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XX素描色彩第一课笔记—明度色阶间隔

发表于2025-11-24|更新于2025-11-24

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手把手教你快速完成 C.elegans qPCR 引物设计

下载C.elegans目标基因序列在WormBase（https://wormbase.org/#012-34-5）搜索所需要的基因点击这个框，往下拉，注意type上写cDNA的才是我们所要的这块就是我们的目标基因，复制保存为fasta文件，其他基因同样也是这个步骤进行复制使用Primer-BLAST设计引物进入ncbi官网（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/）点击右栏的Blast，拉到下面点击Primer-BLAST 粘贴序列设置引物的长度注：秀丽隐杆线虫在ncbi里面是nematodes (taxid:6231) 选择物种和形式设置完后点击Get Primers 稍等一会后我们会获得结果需要注意的是，引物Tm值在55-65%，引物GC%在40-60%，引物长度18-25nt之间，即为理想的引物点击Download primer pairs即可下载引物列表之后拿去做qpcr即可

线虫培养、同步化及相关培养基制备指南

记录于 2025-4-21对现有的实验方案进行部分调整 LB 培养基固体需加琼脂粉 15 g/L（250 mL 加 3.75 g）配方（1L / 250 mL） 1L 250 mL NaCl 5 g 1.25 g 胰蛋白胨 10 g 2.5 g 酵母提取粉 5 g 1.25 g 使用 1M NaOH 调 pH 7.5，121℃ 高压灭菌。 NGM 培养基（铝箔包装）成分 1L 400 mL 100 mL NaCl 3.0 g 1.2 g 0.3 g 细菌蛋白胨 2.5 g 1 g 0.25 g 琼脂粉 17 g 6.8 g 1.7 g 去离子水 975 mL 390 mL 97.5 mL 121℃ 高压灭菌，冷却至 55℃ 后加入：添加剂 1L 400 mL 100 mL 胆固醇 (5 mg/mL) 1 mL 0.4 mL 0.1 mL 1 M CaCl₂ 1 mL 0.4 mL 0.1 mL 1 M MgSO₄ 1 mL 0.4 mL 0.1 mL 1 M KPO₄...

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