前言

在做秀丽隐杆线虫实验的时候,我们往往需要对线虫测定脂肪分布,这时候可能需要使用油红O染色法测定线虫脂肪滴的分布,在这里就简易地说一下测定的方法。

实验准备

需要有ImageJ软件、油红O线虫染色的照片如图所示:

0009.jpg

测定过程

打开ImageJ

其软件界面如图所示:

image.png

首先点击Analyze——Set Measurement..

按图选择所需要的指标:

image.png

点击OK

打开线虫染色的图片

点击File——Open——选择照片

图片RGB转灰度处理

点击Image——Type——8-Bits

此时图片变成灰度图:

image.png

将图片反转选择

点击Edit——Invert

此时图片变成如下图所示:

image.png

设定阈值

点击Image——Adjust——Threshold

image.png

按照所需要的数值进行调整,尽量将线虫染色的区域囊括进去

随后点击

image.png

对线虫本体进行框选

image.png

测定响应值

框选完毕后测定响应值,点击Analyze——Measure

image.png

得出测定油红O的响应值,一般文献会选择线虫的平均光密度

也就是平均光密度=IntDen / Area

在这里的数值为:152.035, 和Mean值基本相同,所以一般我会使用Mean数值进行记录