秀丽隐杆线虫油红O响应值测定方法
前言
在做秀丽隐杆线虫实验的时候,我们往往需要对线虫测定脂肪分布,这时候可能需要使用油红O染色法测定线虫脂肪滴的分布,在这里就简易地说一下测定的方法。
实验准备
需要有ImageJ软件、油红O线虫染色的照片如图所示:
测定过程
打开ImageJ
其软件界面如图所示:
首先点击Analyze——Set Measurement..
按图选择所需要的指标:
点击OK
打开线虫染色的图片
点击File——Open——选择照片
图片RGB转灰度处理
点击Image——Type——8-Bits
此时图片变成灰度图:
将图片反转选择
点击Edit——Invert
此时图片变成如下图所示:
设定阈值
点击Image——Adjust——Threshold
按照所需要的数值进行调整,尽量将线虫染色的区域囊括进去
随后点击
对线虫本体进行框选
测定响应值
框选完毕后测定响应值,点击Analyze——Measure
得出测定油红O的响应值,一般文献会选择线虫的平均光密度
也就是平均光密度=IntDen / Area
在这里的数值为:152.035, 和Mean值基本相同,所以一般我会使用Mean数值进行记录
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